高通量組織研磨儀對植物葉片的液氮冷凍研磨實驗
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發(fā)表時間:2018-12-13 01:55:48
【文章導讀】“植物葉片的冷凍研磨實驗”, 如何應用高通量組織研磨儀研磨植物葉片,以下小編為大家整理研磨植物葉片的詳細步驟:
處理材料:植物葉片 (水稻、玉米、小麥、草、蔬菜葉等)
- 1 裝物料:將植物葉片截成所需的小段,用鑷子夾住,放入1.5/2ml的離心管管底,對離心管進行編號?,F(xiàn)以24空離心管適配器為例;
- 2 裝研磨珠:每個離心管內裝上1個5mm碳化鎢(或氧化鋯)研磨珠,或3mm碳化鎢(或氧化鋯)研磨珠5個;
- 3 冷凍保存:將鋁合金夾具夾住24孔,固定好,放到專業(yè)液氮盒中,加液氮冷凍,3-5分鐘,充分冷凍夾具及管內樣品。
- 4 溶劑加入:如有需要,在每個離心管中,小心加入裂解液或其他溶劑;
- 4 主機運轉:設定轉速與時間例如1500轉/分鐘 3min,點擊Start
- 5 研磨過程:在典型研磨時間(2~3min)內,研磨結束??赏瑫r得到2*24=48個通量的樣品;
- 6 取下夾具,進行下一步實驗。
注意事項:在上夾具時,要注意一是要帶上厚一點的手套,防止被液氮凍傷;一是要迅速,且要保證螺栓擰緊,卡上保險扣。然后,啟動研磨。高通量組織研磨儀同時適用動物組織(骨骼、肌肉、內臟、毛發(fā)等)的研磨,高通量提取DNA/RNA。
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